Попытки использовать глицерин для хранения спермы лабораторных животных (грызунов) и других млекопитающих (в частности, домашних животных) поставили перед исследователями новые вопросы и в какой-то степени пролили свет на всю проблему в целом.
Когда сперматозоиды кролика или морской свинки взвешивали в разбавителе спермы, содержащем 10—15% глицерина, они становились неподвижными, а их акросомы, как было обнаружено с помощью ультрафиолетовой микроскопии, сморщивались. Установлено также, что сперматозоиды кролика переносят присутствие 20 или даже 30% глицерина, если его добавляют медленно путем диализа или если среда совершенно не содержит солей (например, 20% глицерина в 0,25-процентном растворе гуммиарабика; 30% глицерина в 0,1-процентном растворе метилцеллюлозы). Сперма кролика в отличие от спермы петуха сохраняла нормальную оплодотворяющую способность и в присутствии глицерина. Однако после быстрого охлаждения ее до температуры —79° большинство сперматозоидов становилось неподвижным, их акросомы сморщивались и сперма утрачивала оплодотворяющую способность. Сперматозоиды кролика, подвергшиеся диализу против 20-процентного раствора глицерина, были подвижны, а некоторые из них сохраняли почти нормальный внешний вид и подвижность после медленного охлаждения до —79°. Сперматозоиды быка, нечувствительные к резкому повышению концентрации глицерина в окружающей среде, сохраняли высокую активность, когда сперму разбавляли цитратным буфером с глицерином так, что она после разбавления содержала 10—15% глицерина. Однако, когда ту же методику применили по отношению к сперме человека и петуха, не более 10% сперматозоидов пережило быстрое охлаждение до —79° и последующее согревание.