Несмотря на эффективную абсорбцию экзогенных и эндогенных минеральных веществ, в пищеварительном канале часть их переходит в труднодоступную форму и выделяется с калом. Разница между поступлением минеральных веществ с рационом (υi) и их выделением с калом (υF) дает представление о видимом усвоении (υς) элементов. Для определения истинного усвоения (υa) минеральных веществ из рациона необходимо учитывать содержание в кале эндогенных минеральных веществ (υf). Видимое и истинное (υb, υa) усвоение элемента находят по формулам:
υb = υi — υF
υa = υi — υF + υf.
Истинное усвоение минеральных веществ определяют, как правило, в радиоизотопных исследованиях.
Принципы и методы нахождения υb и υa детально описаны в литературе. Если ввести радиоактивный изотоп изучаемого элемента в кровеносное русло, то уже вскоре после этого он обнаруживается в кале. Радиоактивный и стабильный изотопы ведут себя совершенно идентично, они поступают в просвет пищеварительного канала в том же соотношении, в каком находятся в крови. Однако в связи с тем, что в кале всегда находится то или иное количество экзогенного (кормового) элемента, происходит разбавление радиоактивного изотопа и соотношение радиоактивного и стабильного изотопов оказывается более низким по сравнению с соотношением в крови. Доля эндогенной части в общем содержании элемента (экзогенный + эндогенный) в кале тем выше, чем меньше разбавление радиоактивного элемента стабильным по сравнению с соотношением этих изотопов в крови. Если известно, какую долю в кале занимает эндогенная часть, определено общее содержание элемента в кале и рационе, то тогда легко рассчитать абсолютное количество эндогенного элемента в кале.
Для определения содержания эндогенных минеральных веществ в кале чаще всего пользуются следующими двумя довольно близкими методами. Подопытным животным после соответствующей подготовки (достаточно продолжительного кормления испытуемым рационом, привыкания животных к условиям содержания в обменных клетках) однократно внутривенно вводят радиоактивный изотоп изучаемого элемента. Затем по одному методу через 7—10 дней (ряд исследователей предпочитают и более поздние сроки) ежедневно отбирают пробы крови. Поскольку от момента экскреции радиоактивного элемента в желудочно-кишечный тракт до его выделения с калом проходит определенное время (в зависимости от вида животных и изучаемого элемента оно принимается равным 24—48 ч), то сбор кала смещается на 24—48 ч по сравнению с графиком отбора крови. В пробах кала и плазмы (сыворотке) крови определяют концентрацию радиоактивного и стабильного изотопов и по полученным данным рассчитывают удельную активность элемента.
Удельная активность (УА) — количество радиоактивного изотопа, выраженное в имп/мин, мккюри, % введенной дозы и т. д., приходящееся на единицу веса данного элемента (мг, г и т. д.).
Содержание эндогенного элемента в кале рассчитывают по следующей формуле:
υf = υF · (УAф на t + 24 – 48 ч) : (УAк на t)
где υf — содержание эндогенного элемента в кале, г; УAф — удельная активность элемента в кале, в избранных — единицах; УAк — удельная активность элемента плазмы (сыворотки крови), в избранных единицах; t — время отбора проб крови; υF — содержание элемента в суточной пробе кала, г.
При использовании второго метода определения содержания эндогенных минеральных веществ в кале пробы крови после инъекции радиоактивного изотопа отбирают систематически, например, по такому графику: через 3—5, 30 мин, 1 ч, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 18, 24 ч и далее ежедневно в течение 7—8 дней. Полный сбор кала осуществляется на протяжении 8—9 или 9—10 дней (после последнего отбора пробы крови кал собирают в течение 24—48 ч. Время определяют по максимальной активности кала, которая обнаруживается после внутривенного введения радиоактивного изотопа).
В исследованиях на сельскохозяйственных животных наиболее детально изучены закономерности выделения эндогенного фосфора и кальция. В обобщенном виде данные о потерях эндогенного кальция и фосфора с калом, истинном их усвоении весьма вариабельны: на них влияют возраст животных, физиологическое состояние, характер питания, статус минерального метаболизма.