Для исследования ранних стадий развития генеративных структур злаков фиксируют весь колос, для более поздних — отдельно пыльники и завязи. Изучают пыльники в 2 сечениях — продольном и поперечном.
Для исследования развития пыльника следует использовать как постоянные, так и временные препараты (толщина срезов 10—15 мкм). Изучение микроспорогенеза и выявление различных корреляций в развитии всего пыльника следует проводить на постоянных препаратах, окрашенных гематоксилином по Делафильду, Эрлиху и Гайденгайну, а также реактивом Шиффа с подкраской лихтгрюном. Некоторые моменты развития пыльцы (например, расположение ядер и клеток, фертильность) изучали в ацетокармине и на живом материале, используя при этом культуру in vitro (жизнеспособность пыльцы). В связи с тем, что развитие пыльцы характеризуется рядом специфических особенностей, которые плохо выявляются на постоянных препаратах, следует использовать методику, разработанную И. Д. Романовым и его сотрудниками.
До настоящего времени практически нет совершенной методики исследования макроспорогенеза и развития женского гаметофита на живом материале. Вследствие этого женские генеративные структуры изучают в основном на постоянных препаратах. Это необходимо еще и потому, что завязь и все структуры, развивающиеся в ней, имеют сложное строение.
Как уже было отмечено, при дорсовентральности строения семяпочки, а также зародышевого мешка и его элементов особое внимание необходимо обратить на расположение завязи в блоке. Исследование завязи, семяпочки и зародышевого мешка проводили в основном в 3 плоскостях — билатеральной, дорсовентральной и трансверсальной. Единственный ориентир на завязи для определения плоскости сечения — бороздка, а в семяпочке — положение плаценто-халазы и расположение в ней проводящей системы. На медианных дорсовентральных срезах очень хорошо видна вся плаценто-халаза, а в ней — длинные витки спиральных сосудов. При косых срезах обнаруживается часть плаценто-халазы, а в ней просматриваются лишь отдельные фрагменты витков сосудов.
Расположение синергид, яйцеклетки и полярных ядер в зародышевом мешке пшеницы с самого начала их образования выявляется только при сопоставлении срезов, сделанных в разных плоскостях. Для ранних стадий развития завязи и семяпочки лучшими являются фиксаторы Навашина и Карнуа. Толщина срезов может колебаться от 10 до 15 мкм. Для изучения редукционного деления можно использовать реактив Шиффа с подкраской лихтгрюном и генцианвиолетом с подкраской оранжем Ж и др.
Как мы уже отметили, методика для изучения женской репродуктивной сферы на временных препаратах далеко не совершенна. Тем не менее, некоторые данные были получены как нами, так и другими исследователями (Morrison, 1955, и др.).
Для приготовления давленого препарата на предметное стекло берут завязи, фиксированные по Карнуа или по Навашину, с предварительной обработкой смесью 96%-ного спирта и ледяной уксусной кислоты (3: 1), окрашенные реактивом Шиффа по Фёльгену (при гидролизе 10—15 мин). Затем лезвием бритвы завязь разрезают на 2 половинки по бороздке, кладут срезанной поверхностью вверх и прикрывают покровным стеклом, которое легко надавливают карандашом с резинкой на конце. Эту процедуру можно сделать осторожно кончиком пальца, предварительно накрыв препарат фильтровальной бумагой. Недостаток описанного метода состоит в том, что в толще тканей завязи нужные структуры плохо обнаруживаются.
Временные препараты приготавливают и другим способом. Сначала извлекают семяпочки из живых завязей с помощью препаровальных игл под бинокулярной лупой. Извлечение проводят в 5—10 %-ном растворе сахарозы, чтобы семяпочки не лопались. Потом семяпочки фиксируют по Карнуа и Навашину, окрашивают по Фёльгену или ацетокармином и исследуют давленые препараты под микроскопом.