А. Проращивание на промокательной бумаге семян
Ацепа sativa, Hordeum vulgare, Oryza sativa, Secale cereale и Triticum aestivum.
Проба: 400 семян.
Среда: смоченные листы промокательной бумаги, заложенные в закрытые сосуды для сохранения высокой влажности; расстояние между семенами не меньше 2 см.
Инкубация: семена ячменя проращивать 8 дней при 20° С; риса — 6дней при 22° С: ржи — вначале 4 дня при 10° С, затем 3 дня при 20° С; пшеницы — 14 дней при 10° С.
Чтобы стимулировать спорообразование у некоторых видов грибов, рекомендуется при испытании семян ячменя, риса и ржи чередовать 12-часовые темные и светлые циклы с использованием «ближнего» ультрафиолетового излучения. При испытании семян пшеницы длительный период инкубации при низкой температуре, требующийся для выявления Septoria, рекомендуется проводить в темноте.
Просмотр ведется при слабом увеличении микроскопа: семян ячменя — в частности на Helminthosporium gratnineum, Н. teres, И. sativum, Fusarium nivale и другие виды Fusarium;. риса — на Heiminthosporium oryzae, Pyricularia orysae и Triehoconis padwickii, ржи — на Fusarium nivale, F. graminearutn и Helminthosporium sativum; пшеницы — в частности на Septoria nodorum, Fusarium nivale, F. graminearum и Helminthosporium sativum.
Б. Метод агаровых пластинок для семян зерновых.
Проба: 400 семян.
Предварительная обработка: заложить семена на 10 мин. в раствор гипохлорита натрия, содержащий примерно 1 вес % активного хлора, и дать стечь избытку жидкости.
Среда и приготовление пластинок: 2%-ный солодовый агар в чашках Петри диаметром 9,5 см; 10 семян на чашку.
Инкубация: 6 дней при 22° (28° для Н. victoriae).
Просмотр на присутствие видов Fusarium, Helminthosporium avenae, Н. sativum и Н. victoriae; пластинки просматривают невооруженным глазом на присутствие характерных колоний грибов. В некоторых случаях может потребоваться микроскопическое исследование, в частности для дифференциации видов Fusarium.
В. Испытание зародышей Hordeum vulgare на зараженность пыльной головней (Ustilago nuda). Проба: не меньше 2000 семян, если допустимый уровень зараженности составляет 0,2% или меньше.
Подготовка: имеется описание различных методов замачивания (с NaOH) и выделения зародышей (при помощи набора сит), которые можно применять в зависимости от состояния семян, т. е. в тех случаях, например, когда зародыши разбиты или с трудом выделяются из зерновок. В этом отношении образцы семян различаются в зависимости от условий уборки и, вероятно, от сорта.
Просмотр: просветленные зародыши просматриваются при слабом увеличении микроскопа на присутст-вие типичного мицелия Ustilago nuda в области щитка зародыша.