В процессе эволюции возбудители столбняка приобрели способность к образованию весьма стойких почвенных резервуаров столбнячных спор.
По данным экспериментальных исследований К. И. Матвеева (1960) и М. И Тартакова (1961—1963), споры столбняка при наличии благоприятных почвенных и климатических условий могут прорастать и, превращаясь в вегетативную форму, размножаться. Однако это не дает оснований рассматривать зараженные участки почвы как источники возбудителей инфекции.
Естественной средой обитания, жизнедеятельности и размножения возбудителя является организм животного или человека, в кишечнике которых происходит массовое непрерывное размножение возбудителя с последующим выделением его во внешнюю среду, без чего нельзя себе представить не только возможность возникновения почвенных резервуаров инфекции, но и само существование возбудителя в природе.
Основными источниками инфекции служат сельскохозяйственные животные, особенно травоядные, и в меньшей степени человек, поскольку постоянное интенсивное рассеивание возбудителя с инфицированием обширных территорий свойственно только травоядным животным при стадном их содержании.
Носителями столбнячной инфекции могут быть многие другие виды диких и домашних животных, по как источники инфекции они не имеют существенного эпизоотологического и эпидемиологического значения.