С 1952 г. проводятся интенсивные исследования, посвященные методике обработки бычьей спермы глицерином, ее охлаждения и хранения при очень низкой температуре, а также последующего ее оттаивания и осеменения.
В настоящее время имеется обширная литература, посвященная этой теме, в том числе целый ряд обзорных работ.
Несомненно, в результате некоторых изменений методики качество спермы после оттаивания улучшилось. Тем не менее основные положения остались без изменений и, как правило, мотивы, которыми руководствуются некоторые исследователи, внося те или иные исправления, не всегда бывают убедительными. В процессе новых исследований вскрыта сложная взаимосвязь между различными факторами, включая количественное соотношение яичного желтка, глицерина, цитрата натрия и других компонентов среды, продолжительность обработки глицерином перед замораживанием и скорость охлаждения до —79°. Судя по проценту сперматозоидов, у которых после оттаивания восстановилась подвижность, изменение любого из этих факторов влечет за собой изменение оптимальных величин всех других факторов. Однако пробы, сохранившие-наибольшую подвижность после замораживания и оттаивания, не всегда обладают наиболее высокой оплодотворяющей способностью. Все эти осложнения не были еще полностью оценены, когда раздались первые голоса о настоятельной необходимости усовершенствования методики. В настоящее время некоторые положения уже достаточно определились, и, несмотря на трудность интерпретации, мы считаем необходимым рассмотреть их несколько подробнее.