Со времени открытия первого возбудителя из группы Brucella прошло более 80 лет.
В течение всего этого времени благодаря накоплению новых знаний о бруцеллах и бруцеллезе происходит пополнение группы бруцелл новыми видами и биотипами, совершенствуются методы специфической диагностики и профилактики заболевания.
Необходимо подчеркнуть, что за последние два десятилетия стало уделяться особенное внимание видам и типам бруцелл с резко измененной антигенной характеристикой, главной отличительной чертой которых является утрата свойства агглютинироваться специфическими бруцеллезными сыворотками, т. е. сыворотками против неизмененных вариантов (биотипов). Эти неагглютинабельные и неагглютиногенные варианты сохраняют свойство иммуногенности, что в еще большей степени подчеркивает актуальность их изучения.
Бруцеллезная инфекция у людей известна с древних времен. По-видимому, наиболее широко было распространено это заболевание у людей в середине прошлого столетия на о. Мальта и побережье Средиземного моря. Заболевание называлось мальтийской, или средиземноморской, лихорадкой. Есть указания (П. Ф. Здродовскпй и др.), что заболевание людей, сходное с мальтийской лихорадкой, описано еще Гиппократом.
Возбудителя мальтийской лихорадки, получившего название Micrococcus melitensis, впервые выделил английский военный врач Брюс в 1887 г. из селезенки умершего от этой болезни солдата на о. Мальта.
Второй важной вехой в изучении заболевания явилось то, что Райт и Семпл (Wright, Semple) открыли в 1897 г. специфическую аглютинацию культуры возбудителя мальтийской лихорадки сывороткой крови больных людей. Эта реакция, получившая название реакции Райта, является до настоящего времени одной из основных диагностических реакций бруцеллеза у сельскохозяйственных животных и человека.
Систематическое изучение заболевания было впервые проведено английской комиссией в 1904—1907 гг. в связи с распространением мальтийской лихорадки среди военнослужащих английского гарнизона на о. Мальта [Брюс, Боссет-Смит, Еир, Харрокс, Кеннеди, Шоу, Чжампт (Bruce, Bosseth-Smith, Eyre, Harrocks, Kennedy, Show, Jaminit)]. Эта комиссия при помощи реакции Райта установила, что на о. Мальта до 41 % коз были заражены бруцеллезной инфекцией.
Комиссия отметила также, что основные клинические симптомы бруцеллеза у коз — аборты и артриты. У 10% коз установлено длительное носительство возбудителя и выделение его с молоком и мочой. Эта же комиссия установила, что бруцеллезом, вызванным Br. melitensis, искусственно заражаются овцы, крупный рогатый скот, свиньи.
Возбудителя бруцеллеза крупного рогатого скота выделили из амниотической жидкости абортированного плода коровы в чистую культуру датские ветеринарные врачи Банг и Стрибольт (Bang, Stribolt) в 1896 г. Возбудитель был назван Вас., abortus bovis (Bang).
Через 16 лет, в 1912 г., американский ученый Траум (Traum) обнаружил возбудителя бруцеллеза в органах абортированного плода свиньи. Ввиду схожести выделенной культуры с возбудителем аборта коров Траум вначале отождествил его с Вас. abortus bovis (Bang), затем возбудитель стал называться по аналогии с возбудителем абортов у крупного рогатого скота Brucella suis (Traum).
Начальную классификацию группы Brucella осуществила американская исследовательница Иванс (Evans) в 1918 г. Она установила, что по морфологическим, некоторым биохимическим свойствам, а также но антигенной структуре оба возбудителя, т. е. Micrococcus melitensis (Bruce) и Вас. abortus bovis (Bang) не отличаются друг от друга. Ее работы были подтверждены другими исследователями, и в 1920 г. Мейер и Фезье (Meyer a. Fensier) объединили двух указанных возбудителей в одни вид Brucella, состоящий из двух типов: 1) Br. melitensis — var. melitensis; 2) Br. melitensis — var. abortus.
Эта классификация даже на тот период была недостаточной, так как в нее не был включен уже известный возбудитель бруцеллеза у свиней. Усовершенствование внес американский ученый Хеддлесон (Huddlesori), который в 1929 г. предложил следующую классификацию:
1-й тип — Br. melitensis = Micrococcus melitensis (Bruce);
2-й тип — Br. abortus = Вас. abortus bovis (Bang);
3-й тип — Br. Suis = Bac. abortus suis (Traum).
Эта классификация оказалась стабильной. Ее принцип сохранился до настоящего времени, так как видовое обозначение варианта возбудителя правильно отображает главную его сущность.
В дальнейшем вновь выявляемые представители рода Brucella обозначались именно по этому принципу. Так, в 1966 г. Подкомитетом по таксономии бруцелл Международного комитета по номенклатуре бактерий был включен в род Brucella новый, 4-й, вид Br. neotomae, вызывающий бруцеллез у крыс, обитающих изолированно от человеческого жилья в глухих лесах в Америке. Следовательно, у этих крыс — Neotomaelepida Thomes — почти исключается контакт с домашними животными.
Указанного возбудителя открыли Стоеннер и Лакман в 1957 г. (Stoenner a. Lackman).
Затем в 1970 г. Подкомитетом по таксономии бруцелл было включено в род Brucella еще 2 вида бруцелл: 5-й вид — Br. ovis и 6-й — Br. canis. Вид Br. Canis включен условно. Br. ovis вызывает особую патологию у овцематок и баранов, отличающуюся от патологии, вызываемой у этого вида животных Br. melitensis (всеми тремя биотипами). Возбудителя этого заболевания выделил Бадл (Buddie) в 1953 г. и назвал его Br. ovis.
Бруцеллезу собак в последнее время уделено значительное место в литературе. Первое описание этого заболевания сделал Кармайкл (Karmichael, 1966).
Кроме увеличения числа видов бруцелл, возросло также и количество биотипов, входящих в первые 3 вида бруцелл. Так, по современной (1970 г.) номенклатуре в группе Br. melitensis рассматривается 3 биотипа, в группе Br. abortus — 9 биотипов и в группе Br. suis — 11 биотипов.
Основными хозяевами для всех 3 биотипов, относящихся к виду Br. melitensis, являются овцы и козы, а для 9 биотипов, принадлежащих к виду Br. abortus, — крупный рогатый скот. Биотипы, входящие в вид Br. suis, не обладают такой выраженной устойчивостью к определенному хозяину, как Br. melitensis и Br. abortus. Так, 2-й пиотип Br. suis поражает и свиней и зайцев, 4-й биотип — северных оленей, 5-й биотип — крупный рогатый скот и овец.
Однако миграция бруцелл с одного вида животных на другой принципиально доказана в отношении Br. melitensis и Br. abortus. Так, миграцию Br. melitensis на крупный рогатый скот описал М. К. Юсковец (1952). Причем Br. melitensis, паразитирующая в стадах крупного рогатого скота, отличается высокой патогенностью. 11. А. Вершилова (1961) отмечает возможность заражения людей бруцеллами вида Br. melitensis через молоко коров, заразившихся ним видом возбудителя. Теалетти (Tualetti, 1962) сообщает о миграции Br. melitensis на крупный рогатый скот в Италии, а Пиле (Pilet, 1961) — во Франции. Экспериментальное и естественное заражение коров и свиней бруцеллами вида Br. melitensis было показано еще британской комиссией (1904—1097 гг.). Этой же комиссией установлено, что зараженные коровы могут выделять возбудителя вида Br. melitensis с молоком.
Имеются многочисленные данные, показывающие миграцию Br. rvielitensis на крупный рогатый скот.
В отношении возможного перекрестного заражения крупного рогатого скота и свиней возбудителями видов Br. abortus и Br. suis имеются противоречивые данные, хотя большинство исследователей не подтверждает взаимной миграции указанных видов бруцелл (с крупного рогатого скота на свиней и наоборот).
С. Н. Вышелесский (1948) указывает на отрицательный результат Опыта при попытке заразить 9 молодых стельных коров культурой Br. suis и 8 молодых супоросных свиней культурой Br. abortus.
Нами совместно с Д. И. Шохором (1958—1962) было проведено наблюдение за репродукторным хозяйством, которое в течение 2 лет располагалось в непосредственной близости от бруцеллезного изолятора крупного рогатого скота. Случаев заболевания свиней бруцеллезом здесь не наблюдалось. В литературе нет также данных, подтверждающих возможность заражения свиней бруцеллезом от крупного рогатого скота.
Существующая миграция бруцелл от одного вида животных на другой, возможность заражения бруцеллезом людей 3 видами бруцелл — Br. melitensis, Br. suis и Br. abortus, а также многочисленность биотипов внутри некоторых видов бруцелл поставили перед наукой задачу изыскания более точных способов дифференциации биотипов в группе бруцелл.
Каждый биотип, в том числе и основной (референтный) представитель вида, обладает своими особенностями, позволяющими различать его среди известных представителей рода Brucella.
Дифференциальные свойства видов и биотипов рода Brucella сведены в специальную таблицу, принятую на заседании Подкомитета по таксономии бруцелл Международного комитета по номенклатуре бактерий, состоявшемся 7 августа 1970 г. в г. Мехико.
Данная дифференциальная таблица является официальной, ею пользуются и в нашей стране при типировании бруцелл, выделяемых из организма животных и человека.
Подкомитет по таксономии рода Brucella Международного комитета по номенклатуре бактерий (1970 г.) признал 5 видов в роде Brucella: Br. abortus, Br. melitensis, Br. neotomae, Br. ovis и Br. suis. Brucella canis ввиду недостаточности данных об этом микроорганизме не отнесен ни к виду, ни к биотипу какого-либо вида. Подкомитет одновременно рекомендовал определить нетипичные штаммы для каждого из видов бруцелл и эталонные штаммы каждого биотипа в пределах вида.
Мейер и Морган (Mayer a. Morgan) провели большую исследовательскую работу в этом направлении, результаты которой опубликованы ь 1973 г. Ввиду того, что из числа признанных 5 видов бруцелл в роде Brucella первоначальный типичный штамм сохраняется только для вида Br. neotomae, а первичные штаммы 4 других видов утеряны, то авторы взяли штаммы 4 видов бруцелл, которые по своим свойствам имели сходство с первоначально выделенными штаммами данных видов бруцелл и каждый из них одновременно соответствовал характеристикам видов бруцелл, признаваемым в настоящее время. Следовательно, взятые авторами штаммы должны отражать современное представление о роде Brucella.
Эти референтные штаммы следующие: Br. abortus (Schmidt а. Weis, Meyer a. Shaw) — штамм 544 (АТСС 23488); Br. suis (Hud — dleson) — штамм 1330 (АТСС 23444); Br. melitensis (Hughes, Meyer a. Shaw) — штамм 16 M (ATCC 23456); Br. ovis (Buddie) — штамм 6390 (АТСС 25840).
В соответствии с рекомендацией Подкомитета по таксономии рода Brucella (1970 г.) указанные штаммы обозначены как нетипичные в своих видах. Для идентификации и описания указанных нетипичных штаммов вида и эталонных штаммов для биотипов данного вида Мейер и Морган использовали методы, рекомендованные Подкомитетом по таксономии рода Brucella (Stableforth a. Jones, 1962), а также методики, представленные Meyer (1964); Morgan и Gower (I960), Alton и Jones (1967) и экспертами Комитета по бруцеллезу ФАО/ВОЗ (1971 г.)
Окислительную активность бруцелл определяют в аппарате Варбурга обычным манометрическим методом. Посев производят в агар Альбими (37°С). Исследуют двухсуточную культуру.
Необходимо подчеркнуть, что, сохраняя для каждого вида свои основные особенности, многие -штаммы бруцелл обладают способностью приобретать характеристики, отклоняющиеся по различным показателям от основных. Учитывая это, Стейблфорт (Stableforth, 1962) на основании сопоставления особенностей метаболизма штаммов бруцелл высказывает мнение, что штаммы бруцелл формируют множество таких особенностей. Аналогичное заявление, но в более конкретной форме сделал Вильсон (Wilson, 1933). Автор на основании результатов исследования метаболизма у более чем 300 штаммов бруцелл сделал вывод, что промежуточные формы между определившимися видами бруцелл возникают так часто, что это дает возможность предположить, что возникающие специфические особенности бруцелл изменяются вместе с изменением окружающей среды.
Рену (Renoux, 1958) склонен к тому, что видовые особенности штаммов бруцелл недостаточны для того, чтобы классифицировать виды в пределах рода Brucella.
Схема классификации бруцелл, принятая в 1970 г., как и предыдущие, часто изменявшиеся схемы, в дальнейшем, по-видимому, будет уточнена в связи с новыми данными в отношении антигенной структуры бруцелл, вариаций метаболизма и др. Уточнение схемы классификации бруцелл по антигенной структуре особенно необходимо потому, что в настоящее время во многих странах, в том числе и в СССР, проводятся широкие опыты по борьбе с бруцеллезом сельскохозяйственных животных с экспериментальным использованием и комплексе мероприятий неагглютинабельных и неагглютиногенных противобруцеллезных вакцин.