Факультет

Студентам

Посетителям

Метод С. С. Хохлова, М. И. Зайцевой и П. Г. Куприянова

Зафиксированные ацеталкоголем (1:3) завязи помещают в насыщенный раствор двууглекислого натрия, затем ополаскивают их дистиллированной водой. Препаровальной иглой семяпочки отделяют от плаиенты под лупой и опускают в пробирки с цитазой. Объем жидкости должен превышать объем семяпочек не менее чем в 2 раза. Пробирки, плотно закрытые резиновыми пробками, ставят в штатив, закрепленный на оси электромотора.

Вращение пробирок происходит так, что жидкость с материалом перемещается вдоль пробирки. Оптимальное число оборотов электромотора 10—20 в 1 мин. Мацерация тканей семяпочек наступает через 24 ч. Цитаза удаляется после 3-минутного центрифугирования (5000 об./мин). Материал промывают, встряхивая осадок, в дистиллированной воде и снова центрифугируют. В тех же пробирках суспензию клеток протравливают квасцами в течение 3 мин, споласкивают дистиллированной водой и окрашивают в ацетокармине. Каждая операция сопровождается центрифугированием и удалением надосадочной жидкости. Время окрашивания в ацетокармине устанавливается эмпирически. В пробирку с окрасившимся материалом добавляют несколько капель смеси ледяной уксусной кислоты и глицерина (1:1). Суспензию материала в смеси ледяной уксусной кислоты и глицерина наносят пипеткой на предметное стекло и накрывают покровным, получая временный препарат. Среди клеток, расположенных в один слой, встречаются зародышевые мешки.