Приуроченность некоторых видов Testacida к определенным типам почв, их чуткая реакция на изменение почвенных условий, выражающаяся в изменении численности и видового состава популяции, а также изменении морфологического строения раковинки, выделяет их из прочих групп простейших как благоприятный объект для целей почвенной диагностики (Гиляров, 1955, Bonnet, 1959, 1961, 1964).
Раковинки амеб после отмирания животного хорошо сохраняются, особенно долго — в торфянистых почвах или заболоченных горизонтах, прочная раковинка тестаций позволяет применять такие приемы исследования (изготовление препаратов, почвенных срезов), при которых гибнут или становятся неразличимыми голые формы.
Для изучения раковинных корненожек предлагают следующие методы (Schonborn, 1966).
Коффман (Koffman, 1928) на предметное стекло кладет покровное, на край которого помещается небольшое количество исследуемой почвы. На нее капают несколько капель стерильного водного почвенного экстракта. Пространство между предметным и покровным стеклом действует как капилляр и затягивает жидкость внутрь. С ней проникают и находящиеся в почве раковинки и другие организмы (однако лишь сравнительно небольшие по размеру).
Мартин и Левин (Martin, Lewin, 1915) наливали водную почвенную суспензию в цилиндр и с помощью насоса вдували воздух. На поверхность суспензии помещали прикрепленное пластилином к нитке покровное стекло, на которое оседали раковинные амебы.
При работе с торфяными почвами представляется возможным «выжать» из них на стекло некоторое количество воды, содержащей Testacida. Однако при этом частично выпадают те формы, которые прикреплены к почвенным частичкам (Heal, 1967).
М. С. Гиляров (1955) приводит методику количественного учета тестаций (по Volz, 1951, с изменениями). Взятую из свежего образца почвенную пробу объемом 0,5 см3 заливают раствором плазменного красителя виоламинблау в растворе фенола (по Schonborn, 1966, можно использовать витальный краситель нейтральный красный в разведении от 1 : 1 000 до 1:10 000; применимы также и другие плазменные красители), разводят в 25 раз водой и делят на 5 порций. Взвесь рассматривают под микроскопом в чашке Петри с разделенным на квадраты дном и подсчитывают обнаруженных раковинных амеб, которых затем пересчитывают на исходный объем почвы. Особая методика предложена для анализа торфов: образец долго кипятят, процеживают через мельничный газ и центрифугируют; затем воду сливают, а к осадку прибавляют равный объем глицерина. Просматривают 5 стекол при увеличении Х200.
В настоящее время используют прямые и культуральные методы выделения из почвы и подсчета раковинных амеб, а также метод флотационной экстракции, предложенный Боннэ и Тома (Bonnet, Thomas, 1958).
Прямое микроскопирование почвенной суспензии дает возможность выделить и идентифицировать раковинных амеб и учесть их количество. Для этого из образца почвы, взятого с исследуемой глубины, приготовляют суспензию. В зависимости от частоты встречаемости организмов, а также от количества органического вещества отвешивают 100—200 мг исследуемой почвы, частицы опада и корни отбирают, образец заливают 20— 25 мл стерильной водопроводной воды в колбочке на несколько часов, затем встряхивают в течение 10 мин. Почвенную суспензию сливают в чашку Петри диаметром 10 см с плоскопараллельным шлифованным дном, предварительно расчерченным тонким пером тушью на квадраты по 1 см2. Частицы почвы легким покачиванием и с помощью препаровальной иглы равномерно распределяют по дну чашки тонким слоем, и взвесь просматривают под бинокулярным микроскопом МБС-1 в 14 квадратах, расположенных крестообразно по диагонали чашки. Общее количество амеб, а также отдельных видов амеб в навеске почвы определяется по формуле N/14 x S, где N — число раковинок в 14 квадратах, a S — площадь дна чашки. При анализе свежей почвы необходимо учитывать процент влажности.
Культуральный метод при работе с простейшими применяется рядом авторов (Николюк, 1956; Гельцер, 1964). Он заключается в том, что небольшой образец почвы или подстилки (1 г) добавляют к стерильной среде, где развивается культура (для тестаций, учитывав их медленный рост, в течение нескольких недель). Наиболее благоприятны эти условия для развития тонкостенных форм типа Euglypha и Trinema.
Джонсом и Моллисоном (Jones, Molllson, 1948) была предложена интересная методика (стекла Джонса и Моллисона), дающая возможность подсчитать количество Testacida и благодаря окрашиванию выявить пропорцию живых и мертвых организмов. Почвенный образец просеивают через сито с отверстием 2 мм и отвешивают необходимое количество почвы (подбираемое так, чтобы обеспечить удобство пересчета на 1 г почвы и достаточную плотность организмов в поле зрения). Почву помещают в сосуд с 5 мл стерильной дистиллированной воды и тщательно размешивают. Полученную суспензию переливают в стерильную колбу на 100 мл. В первом сосуде при этом должны остаться лишь грубые частицы песка. Взвесь затем разбавляют до 50 мл 1,5%-ным раствором агара, предварительно профильтрованным в горячем виде через бумажный фильтр. Колбу встряхивают и оставляют на 5 сек. для осаждения тяжелых частиц. Образец берут пипеткой непосредственно под поверхностью суспензии, переносят на стекло счетной камеры Тома, покрывают покровным стеклом и суспензия застывает. Затем счетную камеру погружают в стерильную дистиллированную воду, покровное стекло удаляют, лишний агар, застывший по бокам плоскости, снимают скальпелем. При осторожном колебании стекла в воде пленка всплывает, ее помещают на обычное предметное стекло и медленно, чтобы избежать трещин, подсушивают при комнатной температуре. Высушенные пленки погружают на один час в краску следующего состава: 5%-ный водный фенол—15 мл; 1%-ный водный анилинблау—1 мл; ледяная уксусная кислота— 4 мл. Все это фильтруют через час после приготовления. Пленки быстро промывают, обезвоживают в 95%-ном спирте и из них изготовляют постоянные препараты, которые затем просматривают с иммерсией, а также с использованием фазово-контрастной микроскопии. Подсчитывают количество раковинок в объеме наблюдаемой в поле зрения микроскопа агаризованной суспензии, которое вычисляют умножением площади поля зрения микроскопа на глубину счетной камеры. Зная разведение почвы в агаре, можно легко подсчитать количество организмов на 1 г почвы.