В первые семь суток инкубации для исследования ежедневно бралось в среднем по 30 яиц.
Определение стадий развития цыпленка велось при помощи таблиц Гамбургера и Гамильтона (1951). Это позволило установить наиболее часто встречаемую и, следовательно, наиболее типичную стадию развития цыпленка для данного дня инкубации. Одновременно отмечались стадии развития обоих крайних вариантов, т. е. наиболее отсталых по степени своей дифференцировки зародышей (минус-варианты) и наиболее продвинутых в своем развитии (плюс-варианты), что дало возможность показать изменчивость в темпе развития зародышей, инкубируемых в одно и то же время в одинаковых условиях. В отличие от определительных таблиц Гамбургера и Гамильтона и в дополнение к ним, фотографии внешнего вида зародышей (по третьи сутки инкубации включительно) были сделаны вместе с сосудистыми полями их желточных мешков с различными стадиями формирования амниона и с ранними закладками аллантоиса. С четвертых по седьмые сутки инкубации фотографии внешнего вида зародышей были заменены рисунками, что позволило более наглядно показать их строение. Начиная с пятых суток и до конца инкубации были дополнительно введены рисунки общего вида зародышей, показывающие их естественное положение на желточном мешке. Эти рисунки дают представление о соотношении между величиной зародышей и плодов и размером их амниона, аллантоиса и желточного мешка, а также о их топографии с яйцевыми оболочками и воздушной камерой яйца. Серией таких рисунков удалось в наглядной форме дать представление о взаимоотношениях между быстро и неравномерно растущими частями зародыша и меняющимися в объеме составными частями яйца.
Когда индивидуальные различия во внешнем строении зародышей (восемь суток от начала инкубации) стали менее отчетливо выражены, из инкубаториев промышленного типа для одновременного исследования бралось уже не по 30, как раньше, а от 10 до 15 яиц. С этого же времени интервал между каждой порцией изучаемых цыплят был увеличен до двух суток, а фотографии начали изготовляться только с наиболее типично сформированных особей данного возраста. О строении цыплят плюс — и минус-вариантов было дано только краткое описание.
Материал, полученный из инкубатора лабораторного типа, также послужил для изучения соотношений между отдельными частями зародышей и плодов, желточным мешком и яйцевыми оболочками на разных стадиях их развития.
Этот же материал был использован для получения разрезов через целые зародыши или через некоторые их органы, в дальнейшем подвергнутые гистологическому исследованию.
Для соблюдения всех пропорций и правильных соотношений между чрезвычайно подвижными и резко меняющимися очертаниями и объемами отдельных частей развивающегося зародыша и остатков желтка и яйцевых оболочек (желточной и белковой), приходилось прибегать к уплотнению последних при помощи погружения яиц со слегка надломленной скорлупой в области воздушной камеры в 10% формалин. Дополнительно, для ускорения коагуляции белка, яйца без нанесения дефектов в скорлупе подвергались нагреву в доведённой до кипения воде. Обработанные таким образом яйца разрезались по средней линии продольной оси яйцевой скорлупы или, в отдельных случаях, по наибольшему диаметру их поперечного сечения. Это позволило сделать достаточно точные промеры отдельных частей яйца и по полученным данным составить таблицы схематичных разрезов зародышей и плодов в каждый из изученных дней инкубации.
Для большей стандартизации рисунков и таблиц при их изготовлении приходилось в качестве объекта выбирать такой зародыш или плод, которые первоначально образовывали осью своего туловища с длинной осью яйцевой скорлупы угол, близкий или равный 90°. Последнее было тем более допустимо, что такое положение зародышей в действительности наиболее часто встречается в природе.
Фактический материал представлен соответственно установленным у птиц четырем периодам их развития во время инкубации. Каждый из периодов искусственно разделен на отдельные отрезки во времени, равные одним суткам для зародышевого периода и двум суткам для предплодного, плодного и периода вылупления.
Описание последовательных стадий формирования бластулы и гаструлы, проходящих в начале зародышевого периода (до начала инкубации) сделано исключительно по литературным источникам. На собственном материале для этих стадий изучены только топографические соотношения между зародышем, массой желтка и белковой оболочкой яйца.
Разделение периодов развития цыпленка на отдельные отрезки не связано с прохождением зародышами в это время каких-либо биологических этапов развития; оно основано лишь на большем удобстве пользования таблицами для диагностических целей при оценке общего хода процесса инкубации.
Указанные выше таблицы составлены с учетом современных данных о роли составных частей яйца на каждой из изученных стадий развития цыпленка. Соотношения между отдельными органами зародыша и плода, желтком яйца и яйцевыми оболочками показаны, по возможности, в наиболее приближенном к действительности их положении по отношению друг к другу. Нарушения этого принципа могут быть отнесены лишь к техническим трудностям воспроизведения в виде соответственно тонкой линии очень нежных образований, например, желточной оболочки, серозы и амниона по отношению к огромной массе желтка и белковой оболочки.
Таблицы, изготовленные в красках, дали возможность более наглядно показать судьбу каждого зародышевого листка, принявшего участие в образовании тех или иных органов зародыша.
Для каждой изученной стадии развития зародышей и плодов даны определения, характеризующие наиболее существенные моменты в их формировании. Естественно, что в краткой формулировке оказалось невозможным затронуть хотя бы частично все многообразные процессы, составляющие существо развития организма в соответствующем его возрасте. Однако этим удалось подчеркнуть наиболее характерные особенности в строении тех его органов, которые принимают участие в выполнении важнейших функций в данное время.
Для выбора того или иного наименования стадии приходилось принимать во внимание как изменения, наступающие в структуре зародышей и плодов, так и появление у них новых приспособительных возможностей в связи с этим. Характеристики стадий, примененные в настоящем исследовании, относятся не к отдельно взятому зародышу или плоду, а ко всем вариантам, достигшим данного инкубационного возраста.