Метод основан на учете интенсивности потребления спермиями кислорода, растворенного о сперме.
Об интенсивности дыхания спермиев судят по скорости обесцвечивания раствора метиленовой сини, добавленного к сперме. Чем быстрее обесцвечивается раствор, тем интенсивнее дыхание.
Оценку производят следующим образом. Глазной пипеткой на предметное стекло наносят каплю свежеполученной спермы, другой пипеткой добавляют такого же размера каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, приготовленной на физиологическом растворе, смешивают и быстро насасывают в канал стеклянного капилляра, чтобы образовался окрашенный в голубой цвет столбик длиной 2—3 см. Трубочку кладут горизонтально на белый лист бумаги, следят. Происходит быстрое обесцвечивание жидкости, причем с концов остаются голубоватые полоски, что свидетельствует о поступлении кислорода через свободный конец. Оценку проводят при постоянной температуре 20—22°.
Обесцвечивание сини спермой хряка и жеребца затягивается до 60 мни, поэтому для оценки их спермы этот способ неприемлем.