Способ приготовления препарата зависит от размеров пыльника. Крупный пыльник помещается на предметное стекло в каплю ацетокармина, у него отрезается широкий конец и содержимое выдавливается в краситель. Оболочки пыльника удаляются, после чего капля красителя с материалом накрывается покровным стеклом. Мелкий пыльник целиком помещается в каплю ацетокармина. Приготовленный препарат несколько раз нагревается над пламенем спиртовки.
При этом необходимо следить, чтобы подогреваемая жидкость не закипела. Избыток ацетокармина убирается фильтровальной бумагой после того как пыльца окрасится. Мелкие пыльники хорошо мацерируются при нагревании в красителе и легко раздавливаются при постукивании спичкой по покровному стеклу. Если одного постукивания недостаточно, можно, накрыв препарат полоской фильтровальной бумаги, слегка на него надавить, не допуская при этом сдвигания материала.
Для более интенсивного окрашивания хромосом в пыльцевом зерне бутоны с пыльниками, находящимися в нужной стадии деления, лучше зафиксировать в фиксаторе Карнуа (3:1) или Батталья (5 : 5 : 1 : 1) и уже затем окрашивать. В стадии метафазы первого митоза после окрашивания ацетокармином ярко-красные хромосомы четко видны на фоне светло-розовой цитоплазмы».
Техника исследования мейотических хромосом в микроспорогенезе культурных злаков. «Поведение хромосом в мейозе дает возможность судить о характере конъюгации, а следовательно, степени гомологии хромосом исследуемых форм, о цитологической стабильности, помогает делать выводы о генетической полноценности гамет и причинах стерильности микроспор.
Для приготовления хороших препаратов мейотических хромосом следует выдавливать совокупности материнских клеток пыльцы из покровов пыльника в каплю 45 %-ной уксусной кислоты. Удалив оболочки пыльника с предметного стекла, нужно равномерно распределить выдавленные материнские клетки пыльцы, слегка размешав содержимое капли тонкой препаровальной иглой. Каплю с материалом накрыть покровным стеклом. Легкое надавливание на него делает протопласты клеток достаточно плоскими, а хромосомные конфигурации — доступными для наблюдения в большом количестве материнских клеток пыльцы одного пыльника. Способ выдавливания содержимого пыльника описан ниже.
Обработка материала. Фиксация. В районе Ленинграда материал следует фиксировать с 8 до 10—11 ч утра, а на юге, например в Дербенте, в 5—6 ч утра. Выбирают растения в фазе выхода в трубку, когда колос находится еще глубоко в трубке. Для определения нужной стадии мейоза следует освободить колосок из трубки и извлечь пыльник из колоска, сидящего в середине колоса. Окрашивают пыльник, нагревая его 3—4 раза почти до кипения в капле ацетокармина на предметном стекле, раздавливают, предварительно накрыв его покровным стеклом, и просматривают. Обнаружив нужную стадию мейоза, в фиксирующую жидкость опускают весь колос или фиксируют только по 2—3 срединных колоска с каждой стороны колоса, аккуратно обламывая их с уступов колоскового стержня. Для более быстрого и успешного проникновения фиксирующей жидкости ости с верхними частями колосковых чешуй лучше всего срезать ножницами. Следует иметь в виду, что в колосках, сидящих ниже и выше срединной части колоса, пыльники несколько отстают по стадиям мейоза от пыльников срединных колосков.
Обычно материал фиксируют в смеси Карнуа (3:1) в течение нескольких (3—5) часов, затем переносят в 70 %-ный спирт на 1 сут, после чего помещают в новую порцию 70 %-ного спирта и оставляют в нем до момента исследования.