Метод построен на титрометрическом определении содержания крахмала после его растворения в нагреваемом растворе хлористого кальция, последующего осаждения и окисления.
Последовательность выполняемых операций следующая:
- из средней пробы отбирается навеска массой m = 0,2-1 г и помещается в стаканчик или пробирку;
- в пробирку заливается 10 мл 60%-го этилового спирта, после чего содержимое перемешивается;
- полученную смесь фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают пробирки в центрифугу и вращают 5-10 минут при скорости 2500 об/мин;
- осадок вместе с фильтром переносят из пробирок в стаканчик вместимостью 100 см3, заливают 15-20 см3 50%-го раствора хлористого кальция и кипятят 10-20 мин;
- после кипячения смесь охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят до метки раствором хлористого кальция, перемешивают и фильтруют;
- 10-25 см3 фильтрата помещают в стаканчик пипеткой и прибавляют по каплям 0,1 Н раствор йода, в результате чего в растворе крахмал коагулирует;
- полученную смесь фильтруют через бумажный фильтр, осадок на фильтре промывают два раза (по 10 см) 60%-ным раствором спирта и переносят в стаканчик с помощью дистиллированной воды;
- смесь кипятят до полного растворения крахмала и улетучивания йода (до полного обесцвечивания раствора). Полученный бесцветный раствор переносят в мерную колбу на 50 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают и фильтруют;
- 10 см3 фильтрата пипеткой переносят в коническую колбу вместимостью 250 см3, добавляют по каплям смесь, состоящую из двух частей 0,2 Н-двухромовокислого калия и шести частей серной кислоты плотностью 1,84 г/см3 для получения оливковой окраски, не переходящей в течение 1 мин в травянисто-зеленый цвет. Если окраска раствора будет ярко-зеленой, то немедленно следует прибавить дополнительное количество смеси;
- окрашенный раствор разбавляют дистиллированной водой, количество которой должно быть двадцатикратным относительно объема прибавленной серной кислоты (общий объем приблизительно 100-150 см3), охлаждают и оставляют стоять на 15 мин;
- вносят 0,2 г йодистого калия, колбу закрывают пробкой и оставляют стоять на 2 мин;
- выделившийся йод титруют 0,1 Н-раствором тиосульфата натрия, прибавляя в конце титрования в качестве индикатора несколько капель 1%-ного раствора крахмала;
- титр тиосульфата натрия определяют контрольным опытом по бихромату калия. Один сантиметр кубический 0,1 Н-раствора бихромата калия соответствует 6,75 мг крахмала.