Для своевременного выявления бактериального вилта кукурузы необходимо проводить систематическое обследование посевов кукурузы.
В интродукционно-карантинных питомниках, на госсортоучастках, селекционных станциях, деляночных посевах научно-исследовательских учреждений, где высеваются импортные сорта и гибриды кукурузы, проводят сплошные обследования, отбирая все образцы растений с симптомами бактериоза.
Обследуют также производственные посевы кукурузы, засеянные импортным семенным материалом, и поля отечественных сортов и гибридов, прилегающие к импортным посевам.
Обследование проводится силами и за счет средств обследуемых хозяйств. Контрольные обследования проводят специалисты госинспекций.
Обследование посевов кукурузы следует проводить в три этапа:
1. В фазу всходов…3—4 листа — пожелтение и увядание проростков.
2. В период выбрасывания метелок на листьях появляются бледно-зеленые водянистые полосы, постепенно темнеющие. На пораженных растениях метелки белого цвета. При срезе стебля возможно вытекание слизи желтого цвета, содержащей бактерии. У пораженных растений наблюдается задержка роста — карликовость растений.
3- За две недели до уборки урожая — пятна и продольные полосы желтого и коричневого цвета на листьях, стеблях, обертках початков, невыполненные початки.
Обследование полей проводится по одной ступенчатой диагонали. Обследователь при маршрутном обследовании проводит общий осмотр растений, а в местах остановок — через 30-40 шагов — детально просматривает по 10 растений (1 проба). Для установления заболевания на площади в 10 га достаточно просмотреть 300
растений, свыше 10 га — на каждые следующие 10 га добавляют 8— 10 проб. При обнаружении признаков бактериального вилта кукурузы необходимо отобрать образцы.
Отбор и пересылка образцов. Образцы для лабораторного анализа должны состоять из растений с характерными признаками заболевания. Сильно пораженные растения необходимо срезать целиком, при поражении отдельных органов — пораженную часть, обязательно с захватом здоровой ткани. Отобранные образцы помещают в бумажные пакеты (ни в коем случае не в целлофановые), обязательно вкладывают этикетку с данными по сбору образцов.
Отобранные образцы в кратчайший срок необходимо передать в ближайшую карантинную лабораторию, соблюдая меры предосторожности, исключающие распространение инфекции, и провести анализ на выявление заболевания.
При обнаружении бактериального вилта кукурузы образец необходимо передать во ВНИИКР на подтверждение.
Проверка семян кукурузы на зараженность
При поступлении на экспертизу небольших образцов (несколько десятков семян) анализируется весь образец полностью. От большой партии семян отбирают не менее 200 пгг. Для анализа отбирают щуплые, деформированные семена, более темной окраски, с пятнами, с поврежденным зародышем.
Отобранные семена кукурузы закладывают в чашки Петри по 7 шт. на МПА или КГА. Инкубация при температуре 26—28°С. Первый просмотр на третьи сутки, второй — через неделю. Выросшие колонии просматривают и отсеивают на косяки.
Из отобранных образцов растений делают посев в чашки Петри на МПА или КГА. Инкубация при t 26—28°С. Выросшие колонии просматривают и отсеивают на косяки.
Для идентификации Erwinia stewartii используют серологический метод диагностики с постановкой реакции агглютинации с диагностической сывороткой. Для этого на предметное стекло наносят по капле нормальной и иммунной сыворотки (в разведении 1:100). Из двухсуточной испытываемой культуры готовят суспензию с физиологическим раствором с титром 109 клеток/мл. В каждую каплю на стекле вносят по капле испытываемой культуры. Размешивают содержимое капель стеклянной палочкой, начиная с нормальной сыворотки, и дают постоять 1—3 мин, слегка покачивая стекло. Затем капли просматривают под лупой (увеличение х 7). При прохождении реакции агглютинации в капле с иммунной сывороткой образуются хлопья, с нормальной — равномерная муть.
При постановке реакции в пробирках используются два варианта: с иммунной сывороткой для постановки реакции агглютинации с исследуемой культурой и с типовой культурой возбудителя, взятой в качестве контроля, для сравнения проходящей реакции.