Промышленное получение α-аланина методом ферментации не имеет столь широкого распространения, как получение глютаминовой кислоты.
В отличие от получения других аминокислот микробиологическим способом в виде L-форм α-аланин часто синтезируется в виде рацемата. В основе ферментативного биосинтеза α-аланина лежат три реакции. Одной из них является реакция переаминирования между пировиноградной кислотой и некоторыми аминокислотами, другой — декарбоксилирование аспарагиновой кислоты. Реакция происходит при участии фермента аспартат-β-декарбоксилазы.
Третьей реакцией, которая имеет, вероятно, важнейшее значение, является реакция восстановительного аминирования, осуществляемая аланиндегидрогеназой. Реакция обратима.
Продуцентами α-аланина являются культуры актиномицетов (Str. tyoideus, Str. avicolustus и др.), а также представители рода Brevibacterium (В. amylolyticurn, В. monoflageium) и Corynebacterium.
Процесс ферментации а-аланина мало чем отличается от ферментации глютаминовой кислоты. Источниками углерода являются глюкоза, крахмал (или его гидролизат) в концентрациях 5—10%. Источниками азота — соли аммония или мочевина, дополнительно вводят также незначительное количество казеина, кукурузного экстракта или дрожжевой экстракт. Для культуры Mycobacterium album оптимальными отношениями C:N являются 100:12 и 100:8, при использовании в качестве компонентов среды глюкозы или глицерина и хлористого аммония. Кроме указанных компонентов, в состав сред входят фосфаты, соли марганца, магния и железа, а также биотин, взятый в определенной концентрации. Ферментация происходит в аэробных условиях.
О. Асантиро, К. Ацуо, О. Сюгзити предложили оригинальный способ ферментации α-аланина, используя одновременно три культуры, из которых каждая обладала исключительно высокой степенью активности одного из трех указанных выше ферментов: аланиндегидрогеназы, трансаминазы и аспарат-β-декарбоксилазы. Заключительные операции получения α-аланина обычно осуществляются путем использования ионообменного метода выделения.