Если при замораживании трипаносом можно было обойтись без глицерина, то при разработке методов хранения других патогенных простейших он несомненно принес большую пользу.
Так, Toxoplasma gondii в отсутствие глицерина переносила хранение в замороженном состоянии только в течение нескольких минут, тогда как при содержании в среде 5% глицерина Эйлес и др. всегда добивались положительных результатов при хранении Т. gondii до 209 дней. Эти авторы установили, что большое влияние на выживаемость и вирулентность данного микроорганизма оказывала скорость охлаждения. Когда ампулы погружали непосредственно в баню с температурой —79° и их содержимое замерзало в течение 2 мин, достигая спустя 2,5 мин температуры —60°, простейшие полностью утрачивали вирулентность. При медленном же охлаждении в течение многих часов до —79° они сохраняли жизнеспособность, на что указывал короткий период жизни мышей после введения согретых проб. Вирулентность простейших почти не изменялась в период между 8-м и 209-м днями хранения при —70°. Число жизнеспособных организмов уменьшалось во время хранения проб при —20°, но вместе с тем они оставались вирулентными в течение 128 дней. Примечательно, что даже 5% глицерина оказалось достаточно для выживания замороженных клеток, причем физиологический раствор был лучшей средой для глицерина, чем дистиллированная вода. Описанный метод, использованный в опытах по консервации 5 различных штаммов Т. gondii позволяет сохранять их в чистом виде в течение долгого времени, не требуя повторных перевивок животным, связанных с опасностью возникновения каких-либо изменений.