Идентификация бруцелл в основном требуется для уточнения и ускорения бактериологического диагноза.
Поэтому более приемлемым является быстрый метод РА, проводимый на стекле в момент просмотра бактериологических высевов. Мы ставили реакцию агглютинации (РА) с тремя сыворотками, содержащими S-, OS — и О-антитела, и с контрольной, отрицательной, сывороткой.
В диагностических практических лабораториях можно ставить РА с двумя сыворотками: 1) содержащей OS-антитела, т. е. с обычной иммунной сывороткой, полученной путем двукратной иммунизации животного (кролика, барана) культурой Br. abortus в S-форме или взятой стерильно от свежеинфицированной коровы или нетели и очаге инфекции и консервированной 4% борной кислоты; 2) заведомо отрицательной сывороткой (см. консервирование сывороток для титрования гемолитической системы в РДСК). Обе сыворотки предварительно проверяют в РА со стандартным бруцеллезным антигеном. Позитивная сыворотка должна четко агглютинировать стандартный антиген в разведении 1 : 800 и в более низких разведениях, негативная должна показывать четкий отрицательный результат во всех разведениях.
Реакцию агглютинации ставят следующим образом. На обезжиренное предметное стекло наносят бактериологическими пипетками средней величины капли двух сывороток, разведенных 1 : 25 так, чтобы они при размешивании не соприкасались одна с другой. Затем бактериологической петлей берут небольшую пробу от колонии, вызывающей сомнение о принадлежности к бруцеллам, и растирают вначале в негативной, затем в позитивной сыворотках. После этого предметное стекло слегка нагревают, проводя его над пламенем горелки несколько раз. Реакция проявляется в течение 1—2 минут и характеризуется образованием хлопьев и просветлением капли позитивной сыворотки, отсутствием хлопьев и просветления в капле отрицательной сыворотки, которая остается равномерно мутной.
Положительный результат указывает, что данная культура относится к одному из трех видов рода бруцелл: Br. abortus, Br. melitensis или Br. suis.
В тех редких случаях, когда исследуемая культура оказывается но морфологии колоний типичной, но не агглютинируется, или она оказывается слизистой (мукоидная фаза) и реакция агглютинации не может быть поставлена, получают антисыворотку путем двукратной внутривенной иммунизации кролика (1—2 млрд. 2-суточмой взвеси микробов в наружную краевую вену уха с интервалом 8—12 дней). Через 10—15 дней после второй иммунизации берут у животного кровь и ставят с сывороткой крови пробирочную РА и РСК (РДСК). При положительном результате ставят диагноз на бруцеллез.