Факультет

Студентам

Посетителям

Свойства пшеничных альфа — и бета-амилаз. Влияние ингибиторов

Ингибиторы ферментов всегда интересовали исследователей как вследствие способности этих веществ тормозить действие фермента, так и потому, что природа ингибитора и природа ингибирования могут позволить сделать окончательные выводы об активных центрах фермента.

Что касается выхода в практику, то здесь достижения были весьма ограниченными. Цианид натрия (0,1%-ный раствор NaCN) полностью ингибирует бета-амилазу, но не оказывает влияния на зерновую альфа-амилазу. Аскорбиновая кислота, как показал Роув, неконкурентно ингибирует бета-амилазу, причем ее действие можно устранить низкими концентрациями цистеина.

Гоуш интенсивно работал над установлением существенных для активности пшеничной бета-амилазы групп и собрал литературу по ингибиторам бета-амилазы. Из испытанных окислителей только хлорамин и перманганат калия необратимо ингибируют бета-амилазу. Специфические сульфгидрильные реагенты, такие как р-хлорртутьбензоат и фенилртутьацетат, полностью ингибируют фермент при концентрации 5х 10"5 М, тогда как другие, как йодуксусная кислота, не ингибируют его даже при концентрации 1х10~2М. Ингибирование с помощью названных сульфгидрильных реагентов устраняется сероводородом или цисте ином. Из трех испытанных мышьяковистых соединений два двухвалентных по мышьяку соединения оказывали ингибирующее действие, тогда как пятивалентные не обнаруживали такого свойства. Эти данные позволяют сделать вывод о том, что бета-амилаза содержит существенные для ее активности сульфгидрильные группы, которые, однако, медленно проявляют себя в реакции. К аналогичному заключению пришли Райндел и Белоглавек, которые подавляли активность бета-амилазы с помощью р-хлорртутьбензоата и восстанавливали ее с помощью тиогликолевой кислоты. Ингибирующее действие нитрита натрия, фенилизоцианата, 2,4-динитрофторбензола, формальдегида, нингидрина и ряда кислых красителей показывает, что существенное влияние на активность бета-амилазы оказывает также какая-то из NH2-rpynn, причем эта группа не реагирует как свободная NH2-группа.

Из пшеницы был выделен природный ингибитор, который, по-видимому, является белковым веществом, поскольку разрушается фицином и не диализуется через полупроницаемые мембраны. Он ингибирует амилазу слюны, но не действует на нативные амилазы пшеницы.