В свое время предпринимались попытки хранить бычью сперму при температуре от —15 до —20° в обычных хозяйственных ледниках.
Для сохранения подвижности сперматозоидов потребовались более высокие концентрации глицерина. Сперма, содержащая 20—25% глицерина, оказалась годной для оплодотворения после хранения ее в течение 72 час при температуре —15°, Процент активных сперматозоидов снижался при продолжительном хранении при температуре выше —65. Поэтому исследователи направили свои усилия на усовершенствование методов хранения бычьей спермы при температуре ниже —70° и удлинения периода, в течение которого она совершенно не утрачивает оплодотворяющей способности. Добавление в среду различных сахаров и глицина не повышало оплодотворяющей способности спермы после продолжительного хранения, хотя сперматозоиды в некоторых случаях после оттаивания были более подвижными.
В некоторых пробах, хранившихся в течение 7 лет при температуре от —70 до —79°, сохранилась высокая подвижность и оплодотворяющая способность сперматозоидов. В других же, хранившихся сравнительно короткий период времени (2—3 года), процент живых сперматозоидов снижался. Имеющиеся в нашем распоряжении данные позволяют предполагать, что число потенциально активных сперматозоидов, законсервированных при температуре —79°, с годами постепенно уменьшается. Такое снижение качества спермы, по-видимому, можно задержать или предотвратить с помощью более низких температур, используя для этой цели жидкие атмосферные газы. В Северной Америке эту задачу решили за счет выпуска электрических рефрижераторов, в которых достигается температура —90° и даже ниже. С 1955 г. создано несколько разновидностей таких рефрижераторов. Поскольку они оказались очень удобными для практического применения, многие большие племенные хозяйства полностью перешли на использование замороженной спермы.