Особенно трудной оказалась проблема увеличения продолжительности жизни эритроцитов in vitro. Биохимические процессы в крови можно остановить путем охлаждения ее до очень низких температур.
Однако при замораживании до температуры ниже — 3° и последующем оттаивании клетки гемолизировались, а в процессе высушивания при любой температуре разрушались. Продолжительность жизни эритроцитов in vitro увеличивалась лишь незначительно, когда кровь хранили по методу Струмиа, т. е. при —3 вместо +4°. Тонкую пленку крови, подвергшуюся сверхбыстрому охлаждению в жидком азоте, можно хранить при этой температуре бесконечно долго без каких-либо признаков распада. Такая методика представляла чисто академический интерес; до недавнего времени она не находила широкого применения при создании банков крови. В 1949 г., казалось, было мало надежд разработать какой-нибудь удовлетворительный способ продолжительного хранения цельной крови или отдельных эритроцитов. Новые перспективы открылись в связи с выявлением того факта, что глицерин защищает сперматозоиды птиц от вредного действия процессов замораживания, хранения и оттаивания. Это повлияло косвенным образом на активизацию исследований по замораживанию эритроцитов.